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脊髓灰質炎病毒1型(PV-1)熒光PCR檢測試劑盒說明書
【產品名稱】
商品名稱：脊髓灰質炎病毒 1 型（PV-1）核酸檢測試劑盒(RT-PCR 熒光探針法)
Name ：Diagnostic Kit for Human Poliovirus type 1 RNA (RT-PCR Fluorescence Probing)
【包裝規格】48份/盒
【預期用途】
本試劑盒適用于檢測的咽拭子標本等標本中脊髓灰質炎病毒 1 型 RNA，適用于脊髓灰質炎病毒1型感染的輔助診斷。其檢測結果僅供參考。
【檢驗原理】
本試劑盒用一對脊髓灰質炎病毒1型特異性引物，結合一條特異性熒光探針，用一步法熒光RT-PCR技術對脊髓灰質炎病毒1型RNA進行體外擴增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。
【試劑組成】
說明：不同批號的試劑盒組分不可交互使用。
【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融少于 5 次，
有效期 12 個月。
【標本采集】
采集病人的咽拭子標本，應使用采樣拭子，適度拭抹咽后壁和兩側扁桃體部
位，應避免觸及舌部；迅速將拭子放入標本采集管中，旋緊管蓋并密封，以防干燥。
【使用方法】
1. 樣品處理（樣本處理區）
1.1樣本前處理
取 100uL 棉拭子標本于 1.5mL 滅菌離心管中。
1.2RNA 提取
推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產的 RNA 提取試劑盒（離心柱提取
法），請按照試劑盒說明書進行操作。
2. 試劑配制（試劑準備區）
根據待檢測樣本總數，設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性
對照+1 管陽性對照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：
3. 加樣（樣本處理區）
將步驟 1 提取的 RNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μl，分別加入相應的反
應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。
4. PCR 擴增（核酸擴增區）
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內；
4.2設置好通道、樣品信息，反應體系設置為 25ul；熒光通道選擇：
5.2結果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數增長曲線；
可疑：檢測通道 35.0<Ct 值≤37，建議重復檢測，如果檢測通道仍為 35.0<Ct
值≤37，且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；
陰性：樣本檢測結果 Ct 值>37 或無 Ct 值。
8. 產品性能指標
陰陽性參考品符合率：5 份陽性參考品符合率為 100％；10 份陰性參考品符合率
為 100％。
低檢測限：5.0×102copies/ml。
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