|
甲型肝炎病毒（HAV）熒光PCR核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
商品名稱(chēng)：甲型肝炎病毒（HAV）核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR 熒光探針?lè)?
Name ：Diagnostic Kit for Human Hepatitis Virus type A RNA (RT-PCR Fluorescence Probing)
【包裝規(guī)格】48份/盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒適用于檢測(cè)的疑似感染病人的血液等標(biāo)本中甲型肝炎病毒 RNA，適用
于甲型肝炎病毒感染的輔助診斷。其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒用一對(duì)甲型肝炎病毒特異性引物，結(jié)合一條特異性熒光探針，用一步
法熒光 RT-PCR 技術(shù)對(duì)甲型肝炎病毒 RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，用于臨床上對(duì)可疑
感染者的病原學(xué)診斷。
【試劑組成】
名 稱(chēng) 規(guī) 格
酶液 50μl×1 管
HAV 反應(yīng)液 1.0ml×1 管
HAV 陽(yáng)性質(zhì)控品 50μl ×1 管
陰性質(zhì)控品 250μl ×1 管
說(shuō)明：不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融少于 5 次，
有效期 12 個(gè)月。
【標(biāo)本采集】
疑似感染病人的靜脈血 2mL 至 EDTA-2Na 抗凝管。
【保存和運(yùn)輸】
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過(guò) 6 個(gè)月，標(biāo)
本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
【使用方法】
1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
按 RNA 提取試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行提取。
1.2RNA 提取
推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的 RNA 提取試劑盒（離心柱提取
法），請(qǐng)按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。
2. 試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性
對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照；樣品每滿(mǎn) 7 份，多配制 1 份)，每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
3. 加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的 RNA、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μl，分別加入相應(yīng)的反
應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。
4. PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
4.1將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；
4.2設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25ul；熒光通道選擇：
檢測(cè)通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請(qǐng)勿
選擇 ROX 參比熒光。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析，當(dāng)曲
線(xiàn)出現(xiàn)整體傾斜時(shí)，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15
范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value
值(上下拖動(dòng)閾值線(xiàn)至高于陰性對(duì)照)，重新分析結(jié)果。
5.2結(jié)果判斷
陽(yáng)性：檢測(cè)通道 Ct 值≤35.0，且曲線(xiàn)有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線(xiàn)；
可疑：檢測(cè)通道 35.0<Ct 值≤37，建議重復(fù)檢測(cè)，如果檢測(cè)通道仍為 35.0<Ct
值≤37，且曲線(xiàn)有明顯的增長(zhǎng)曲線(xiàn)，判定為陽(yáng)性，否則為陰性；
陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>37 或無(wú) Ct 值。
7. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品：無(wú)明顯擴(kuò)增曲線(xiàn)或無(wú) Ct 值顯示；
陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線(xiàn)有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期，且 Ct 值≤32；
以上條件應(yīng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
8. 產(chǎn)品性能指標(biāo)
陰陽(yáng)性參考品符合率：5 份陽(yáng)性參考品符合率為 100％；10 份陰性參考品符合率
為 100％。
低檢測(cè)限：5.0×102copies/ml。
精密度：批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)（CV）均小于等于 3%。
甲型肝炎病毒（HAV）熒光PCR核酸檢測(cè)試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：
| 0311羊源性成分(Ovine)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T |
| 0211牛源性成分(Bovine)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T |
| 0111豬源性成分(Porcine)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T |
| 1022大豆內(nèi)源基因Lectin核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法) 48T |
| 1012植物內(nèi)源基因tRNA-Leu核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法) 48T |
| 1002玉米內(nèi)源基因IVR核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法) 48T |
| 0342轉(zhuǎn)基因植物PRSV Rep品系核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法) 48T |
| 0332轉(zhuǎn)基因植物Cry3A基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法) 48T |
| 0322轉(zhuǎn)基因植物Cry1A(c)基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法) 48T |
掃一掃,關(guān)注我們
