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甲型流感病毒H3亞型(IAV-H3)熒光PCR試劑盒說明書
【產(chǎn)品名稱】
商品名稱：甲型流感病毒 H3 亞型（IAV-H3）核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR 熒光探針法)
Name ：Diagnostic Kit for Influenza A virus subtype H3 RNA (RT-PCR Fluorescence Probing)
【包裝規(guī)格】48 份/盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒適用于檢測(cè)的咽拭子標(biāo)本等標(biāo)本中甲型流感病毒 H3 亞型 RNA，適用
于甲型流感病毒 H3 亞型感染的輔助診斷。其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒用一對(duì)甲型流感病毒 H3 亞型特異性引物，結(jié)合一條特異性熒光探針，
用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對(duì)甲型流感病毒 H3 亞型 RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，用
于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。
【試劑組成】
說明：不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融少于 5 次，
有效期 12 個(gè)月。
【標(biāo)本采集】
采集病人或患病動(dòng)物的咽拭子標(biāo)本，應(yīng)使用采樣拭子，適度拭抹咽后壁和兩
側(cè)扁桃體部位，應(yīng)避免觸及舌部；迅速將拭子放入標(biāo)本采集管中，旋緊管蓋并密封，
以防干燥。
【保存和運(yùn)輸】
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過 6 個(gè)月，標(biāo)
本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
【使用方法】
1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
取 100uL 拭子標(biāo)本于 1.5mL 滅菌離心管中，按 RNA 提取試劑盒說明書進(jìn)行提取。
1.2RNA 提取
推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的 RNA 提取試劑盒（離心柱提取
法），請(qǐng)按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。
2. 試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性
對(duì)照+1 管陽性對(duì)照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 IAV-H3 反應(yīng)液 酶液
用量 20μl 1μl
3. 加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的 RNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μl，分別加入相應(yīng)的反
應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。
4. PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
4.1將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；
4.2設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25ul；熒光通道選擇：
檢測(cè)通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請(qǐng)勿
選擇 ROX 參比熒光。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時(shí)間 收集熒光信號(hào)
設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析，當(dāng)曲
線出現(xiàn)整體傾斜時(shí)，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15
范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value
值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照)，重新分析結(jié)果。
甲型流感病毒H3亞型(IAV-H3)熒光PCR試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：
| 0112狂犬病毒(RV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)48T |
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| 0512鸚鵡熱衣原體(CP)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法)48T |
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| 0111狂犬病毒(RV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針法)48T |
| 0511貓衣原體(CP)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)48T |
| 0511鸚鵡熱衣原體(CP)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)48T |
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